Metilação e hidroximetilação global de células bovinas derivadas do fluido aminiótico, tecido adiposo e fibroblastos da pele e seu uso na clonagem na presença ou ausência de tricostatina A.

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Author(s): SILVA, C. G. da; MARTINS, C. F.; CUMPA, H. C. B.; MENDONÇA, A. dos S.; FRANCO, M. M.; BÁO, S. N.

Summary: Metilação e Hidroximetilação Global de Células Bovinas Derivadas do Fluido Amniótico, Tecido Adiposo e Fibroblastos da Pele e seu Uso na Clonagem na Presença ou Ausência de Tricostatina A Carolina Gonzales da Silva1; Carlos Frederico Martins2; Heidi Christina Bessler2; Anelise dos Santos Mendonça3; Maurício Machaim Franco3; Sônia Nair Báo1 ( 1Universidade de Brasília; 2Embrapa Cerrados; 3Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia) O objetivo deste estudo foi determinar a metilação e a hidroximetilação global de três tipos celulares e testar seu uso na transferência nuclear (TN) na presença ou ausência de Triscostatina A (TSA). As células do fluido amniótico (CFA foram coletadas por amniocentese de uma fêmea Gir prenhe e cultivdas em meio Amniomax. O isolamento das células do tecido adiposo (CTA) e fibroblastos (FIB) foi realizado por explante tecidual. Os embriões foram submetidos ao cultivo com 50 nM de TSA durante 20 e 25 horas e o controle foi feito com FIB sem TSA. As taxas foram comparadas pelo teste de Tukey (p<0,05). As análises de metilação e hidroximetilação global foram realizadas por kits da Epigentek®. A taxa de metilação foi de 1,64%, 2,3% e 0,45% para CFA, CTA e FIB, respectivamente, e de hidroximetilação foi de 0,008%, 0,072% e 0,013% para os mesmos tipos celulares. Todos os tratamentos com CFA e o com CTA sem TSA e com TSA por 25 horas apresentaram taxa de blastocistos superior ao controle. O tratamento CTA por 20 horas foi estatisticamente semelhante ao controle. O uso da TSA não melhorou a eficiência da clonagem, enquanto o uso de células tronco mesenquimais (CFA e CTA) mostrou-se superior em produzir blastocistos. Termos para indexação: epigenética, células tronco mesenquimais, transferência nuclear. Fontes de financiamento: Embrapa, CNPq, Capes.

Publication year: 2016

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