Produção heteróloga e caracterização funcional de mono-oxigenases líticas de polissacarídeos de fungos e bactérias.
Produção heteróloga e caracterização funcional de mono-oxigenases líticas de polissacarídeos de fungos e bactérias.
Autoria: SILVA, C. de O. G.; RODRIGUES, K. B.; SOUZA, A. A.; MONCLARO, A. V.; ANASTÁCIO, G. S.; MENDES, T. D.; GONCALVES, S. B.; SALUM, T. F. C.; RODRIGUES, D. de S.; DAMASO, M. C. T.; ABDELNUR, P. V.; FAVARO, L. C. de L.
Resumo: Mono-oxigenases líticas de polissacarídeos (LPMOs) são enzimas de grande interesse industrial por serem capazes de despolimerizar polissacarídeos recalcitrantes, como a celulose, e apresentarem sinergismo com hidrolases na degradação destes polímeros, tendo potencial para aplicação em diversos processos. Este trabalho teve como objetivo produzir e caracterizar LPMOs recombinantes de origem fúngica e bacteriana e desvendar seu potencial para aplicações biotecnológicas. Três LPMOs dos fungos Neurospora crassa, Gloeophyllum trabeum e Botryobasidium botryosum (subfamília AA9) e cinco LPMOs das bactérias extremófilas Thermobifida fusca, Hahella ganghwensis, Salinispora pacifica, Verrucosispora maris e Moritella dasanensis (subfamília AA10) foram selecionadas e expressas pela levedura metilotrófica Pichia pastoris X-33 (reclassificada como Komagataella phaffii). As enzimas recombinantes foram caracterizadas combinando ensaio fluorométrico e ensaio de despolimerização de celulose avaliado por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas. Das oito LPMOs recombinantes obtidas, cinco foram caracterizadas e mostraram -se funcionais por pelo menos um dos métodos utilizados, sendo que três foram capazes de despolimerizar a celulose. A LPMO da bactéria S. pacifica apresentou regioseletividade C1/C4, enquanto as pertencentes a H. ganghwensis e T. fusca apresentaram regioseletividade C1, apresentando potencial para diferentes aplicações biotecnológicas. A capacidade de despolimerizar a celulose faz desse conjunto de LPMOs recombinantes um ativo tecnológico que poderá ser avaliado como insumo para o desenvolvimento de novos produtos/processos que dependem da despolimerização da celulose, p. ex.:, sacarificação de biomassa lignocelulósica para produção de etanol 2G, ração animal, indústria têxtil, entre outras aplicações.
Ano de publicação: 2020
Tipo de publicação: Artigo em anais e proceedings
Unidade: Embrapa Agroenergia
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