Autoria: NECHET, K. de L.; LUIZ, A. J. B.; SOUZA, D. E. H. de; HALFELD-VIEIRA, B. de A.

Resumo: Resumo: O trabalho teve como objetivo padronizar uma metodologia de produção de pré-inóculo de Cercospora aff. canescens (CMAA 1444) capaz de promover regularidade no processo de produção de esporos do fungo em fermentação líquida. O isolado foi cultivado em meio Batata Dextrose Ágar e, após sete dias, dez discos de micélio foram transferidos para Erlenmeyers de 500 mL contendo 300 mL do meio de cultura líquido Czapek-Dox modificado. O Erlenmeyer foi mantido em agitador orbital a 150 rpm por sete dias a 25 °C sob luz contínua. Após este período, a biomassa foi filtrada e alíquotas de 5 mL da suspensão (pré-inóculo) foram transferidas para 36 Erlenmeyers de 250 mL contendo 50 mL de meio Czapek-Dox modificado. Os Erlenmeyers foram numerados e fixados em arranjo 6x6 de um agitador orbital a 150 rpm, luz contínua e 25 °C. O ensaio foi realizado em delineamento inteiramente casualizado e cada Erlenmeyer foi considerado como uma unidade experimental. Após 15 dias, a biomassa foi separada da fração líquida por filtragem e seca a 70 °C até a obtenção de massa constante. A quantificação de esporos por mililitro foi feita na fração líquida. Os dados foram submetidos à análise de variância e a testes de normalidade. Cada linha e coluna do equipamento foram consideradas como tratamentos na análise de variância. A posição do frasco em relação à fonte luminosa não teve efeito significativo na biomassa (1,08 a 1,17 g) e na concentração de inóculo (19 a 30 x104 esporos por mililitro). Houve uma redução de 12 % no coeficiente de variação da concentração de inóculo de C. aff. canescens usando pré-inóculo obtido de cultivo em fermentação líquida. -- Astract: The present work aims to standardize a methodology to produce seed culture of Cercospora aff. canescens (CMAAA1444) to provide a regular production of spores of the fungus under liquid fermentation. The isolate was grown on Petri dishes with potato dextrose agar and, after seven days, ten mycelial disks were transferred to 500 mL Erlenmeyer flasks containing 300 mL of Czapek-Dox modified liquid media. The flasks were placed in an orbital shaker (150 rpm) at 25 °C, under continuous light for seven days, after that the biomass was separated from the liquid fraction by filtration. Aliquots containing 5 ml of the filtrate were used as pre-inoculum and transferred to 36 Erlenmeyers of 250 mL containing 50 mL of Czapek-Dox modified liquid media. The flasks were positioned in a 6x6 arrangement in an orbital shaker (150 rpm) at 25 °C, under continuous light. The assay was carried out in a completely randomized design and each flask was considered an experimental unit. After 15 days, the biomass was separated from liquid fraction, filtered, and dried at 70 °C until constant weight. The concentration of spores per mililiter was obtained from liquid fraction. Data were submitted to analysis of variance and normality tests. Each line and each column of the shaker were considered as treatments in the analysis of variance. The position of culture flasks in relation to the light source did not significantly affected the biomass (1,08 to 1,17 g) and inoculum concentration (19 to 30 x104 spores per mililiter). There was a reduction of 12 % in the coefficient of variation of inoculum concentration of C. aff. canescens by using seed culture obtained from liquid fermentation.

Ano de publicação: 2024

Tipo de publicação: Folhetos

Unidade: Embrapa Meio Ambiente

Palavras-chave: Cercospora Canescens, Corda de Viola, Fungo Para Controle Biológico, Inoculum, Ipomoea, Mico-herbicida, Morning glories, Mycoherbicides, Natural variability, Variabilidade inerente