Author(s): LIMA, R. S. N. de; LEAO, P. C. de S.; SANTOS, C. A. F.

Summary: Neste trabalho, são apresentados valores estimados da quantificação de DNA por espectrofotometria de 219 cultivares procedentes da coleção de Germoplasma de Videira da Embrapa Semi-Árido, localizada no Campo Experimental de Mandacaru, em Juazeiro-BA. O DNA genômico total foi isolado de folhas verdes e sadias, segundo protocolo 500 mM Tris pH 8,0, 1,4 M NaCl, CTAB 2% (p/v), 0,2 % beta-mercaptoethanol, 20 mM de EDTA. A quantificação por espectrofotometria foi determinada medindo-se a absorbância a 260 nm, considerando-se 1 DO = 50 ng/ L de DNA e por uma curva de regressão ajustada aos valores de absorbância de amostras de DNA de concentrações conhecidas. A determinação do grau de pureza, por sua vez, foi obtida, pela razão entre as leituras A260/A280 sendo desejada um valor próximo de 1,8. As concentrações de DNA obtidas variaram de 47,97 à 1451,09 pela curva de regressão e de 86 a 984,0 ng/ L pela equação 1 DO = 50 ng/ L. As estimativas do grau de pureza das amostras, obtidas pela razão entre as leituras à 260 e 280 nm (A260/A280), resultaram em valores que variaram de 1,14 à 2,19. As concentrações de DNA e o grau de pureza obtido foram satisfatórios para 66% das amostras analisadas, demonstrando a adequação do método de extração utilizado.

Publication year: 2006

Types of publication: Paper in annals and proceedings

Unit: Embrapa Semi-arid Region

Keywords: Concentração, DNA, Electrofotometria, Grapes, Pureza, Quantificação, Uva, Videira, Vitis