Maedi-visna vírus: produção de antígeno, análise protéica e antigênica.

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Autoria: ARAGÃO, M. A. C.; PINHEIRO, R. R.; ANDRIOLI, A.; ALVES, F. S. F.; OLIVEIRA, A. A. F.; TEIXEIRA, M. F. S.

Resumo: A Maedi-Visna é uma doença persistente, progressiva e debilitante em ovinos causada por lentivírus que resulta primariamente em pneumonia intersticial e pode estar associada a mamite e encefalite. Este trabalho teve como objetivo produzir antígeno a partir do vírus Maedi-Visna total para utilização em ensaios imunoenzimáticos. Na produção do antígeno foram utilizados cultivos primários de células de membrana sinovial caprina, infectados com amostra padrão (MVVK1514). As suspensões virais foram tituladas e o antígeno semipurificado pela precipitação em PEG (polietilenoglicol) e ultracentrifugação. Foram realizadas eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e Western Blotting (WB). A SDS-PAGE de origem viral e do meio de cultivo resultou em várias bandas protéicas. No WB constatou-se a presença de sete proteínas imunogênicas de pesos moleculares aproximados de 16, 27, 35, 50, 42, 63 e 123 kDa. Destas, três proteínas (16, 27 e 50 kDa) apresentaram boa reação imunogênica. O trabalho abre perspectivas da utilização de testes imunoenzimáticos com maior sensibilidade para lentivírus ovino. [Maedi-Visna virus: antigen production, protein and antigenic analysis]. Abstract - Maedi-Visna is a persistent, progressive and debilitating disease in sheep caused by lentivirus which results primarily in interstitial pneumonia and may be associated with mastitis and encephalitis. This study aimed to produce antigen from the Maedi-Visna virus for use in immunosorbent assay. The antigen was produced using secondary cultures of cells from sheep synovial membrane, infected with the standard sample (MVV-K1514). The suspensions were titered and the viral antigen was semipurified by precipitation in PEG (polyethylene) and ultracentrifugation. The isolates were then submitted to polyacrylamide gel electrophoresis (SDSPAGE) and the western blot (WB) technique. The SDS-PAGE of viral origin and of the culture medium resulted in several protein bands. The WB revealed the presence of 7 immunogenic proteins of approximate molecular weights of 16, 27, 35, 50, 42, 63 and 123 kDa. Of these, 3 proteins (16, 27 and 50 kDa) showed good immunogenic reaction. This work opens up prospects of using enzyme immunoassay with greater sensitivity to lentivirus-infected sheep.

Ano de publicação: 2008

Tipo de publicação: Artigo de periódico

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