Otimização de protocolos de extração de RNA em diferentes tecidos de milho.
Otimização de protocolos de extração de RNA em diferentes tecidos de milho.
Author(s): PORTO, B. N.; MAGALHAES, P. C.; CAMPOS, N. A.; ALVES, J. D.; MAGALHÃES, M. M.
Summary: Neste trabalho, foram testados cinco métodos de extração de RNA (CTAB microextração, Concert? Invitrogen, Concert? Adaptado, TRI Reagente® Sigma e TRI Reagente® Adaptado), em dois diferentes tecidos de milho (mesocótilo e raiz), com o objetivo de estabelecer um método eficiente de extração de RNA, visando posteriormente estudos de expressão gênica. Observou-se que o método Concert,utilizando o protocolo adaptado, foi o mais eficiente para a extração de RNA de ambos os tecidos de plântulas de milho, originando 2351,35 ?g por 100 mg de tecido para mesocótilo e 893,75 ?g por 100 mg de tecido para raiz, considerando tanto a quantidade como a qualidade das amostras, podendo ser submetidas às etapas posteriores de tratamento com DNAse e construção de cDNA para estudos de expressão gênica. Pôde-se observar que pequenas modificações nos protocolos, como, por exemplo, mudança no tempo e na posição dos tubos durante a incubação e o incremento de duas lavagens com clorofórmio, podem melhorar muito tanto a qualidade quanto a quantidade do RNA extraído.
Publication year: 2010
Types of publication: Journal article
Unit: Embrapa Maize & Sorghum
Keywords: Nucleic acids, Raiz, Roots, Zea mays, Ácido nucleico
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