Desenvolvimento e validação de metodologias para mapeamento físico de genes em cromossomos meióticos de Phaseolus vulgaris geneticamente modificado utilizando FISH de elevada resolução
Desenvolvimento e validação de metodologias para mapeamento físico de genes em cromossomos meióticos de Phaseolus vulgaris geneticamente modificado utilizando FISH de elevada resolução
Um dos grandes desafios que produtores de feijão (Phaseolus vulgaris) enfrentam atualmente é a pequena disponibilidade de cultivares comerciais com resistência a estresses bióticos e abióticos. Este fato se deve principalmente à pouca disponibilidade de informações sobre a genética e a genômica desta espécie que poderiam ser utilizadas no desenvolvimento de produtos biotecnológicos. Esta cultura possui uma importância social e econômica muito grande para o Brasil, mas, por uma série de razões, o volume de informações disponíveis ainda é muito restrito, mesmo mundialmente. Apenas recentemente trabalhos de pesquisa têm sido publicados desvendando a complexidade do genoma de Phaseolus utilizando técnicas moleculares e citogenéticas modernas. Tais técnicas podem ser muito úteis para o estabelecimento de programas de melhoramento como foco na produção de cultivares com características agronômicas de interesse. Dada a complexidade em selecionar genomas de Phaseolus para serem utilizados em programas de melhoramento e confiáveis e eficientes, como aquelas utilizadas em trabalhos de identificação e utilização de marcadores moleculares para classificação e seleção genômica em diferentes espécies de diferentes gêneros como, por exemplo, Musa. Entretanto, a robustez destes tipos de marcadores depende de três aspectos: padrão de distribuição dos marcadores nos cromossomos do genoma alvo; localização genética e estrutural destes marcadores sobre regiões conservadas de diferentes genomas; e tais regiões não podem estar envolvidas em translocações cromossômicas durante a meiose. Para atingir este nível de detalhamento para estudos genômicos, ferramentas citogenéticas como a técnica de FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) convencional têm sido utilizadas para tentar mapear genes nos cromossomas. Exceto por poucas tentativas de mapear as seqüências 5S e 18-25S do DNA ribossomal para estudos evolutivos de Phaseolus, poucos trabalhos tem utilizado cromossomos meióticos para mapeamento e, na extensão do nosso conhecimento, nenhum estudo foi publicado utilizando a técnica de FISH de elevada resolução com cromossomos meióticos para mapeamento de construções gênicas utilizadas na produção de feijão geneticamente modificado. Para a cultura do feijão já existem inúmeros estudos que levaram a produção de cultivares com alta qualidade agronômica e com resistência a doenças. Apesar de existirem alguns mapas genéticos e alguns poucos estudos utilizando a técnica de FISH convencional (cromossomos mitóticos), o genoma de Phaseolus ainda não foi sequenciado e são poucas as bibliotecas de BAC existentes e poucas as sequências gênicas selecionadas e caracterizadas. Este projeto pretende desenvolver ou adaptar metodologias de FISH de elevada resolução para uma espécie de feijão transformado para resistência a vírus por meio da técnica de RNA interferente. Através desta metodologia, pretende-se mapear os pontos de inserção da construção gênica nos cromossomos das plantas transformadas utilizando como sonda a construção gênica utilizada no processo de transformação. Para os estudos com o feijão, a técnica de FISH de elevada resolução utilizando cromossomos meióticos será desenvolvida e validada levando em conta protocolos desenvolvidos para outras leguminosas e para outras plantas como solanáceas.
Ecossistema: Floresta Atlântica, Região dos Cerrados
Situação: concluído Data de Início: Sun Jan 01 00:00:00 GMT-03:00 2012 Data de Finalização: Tue Dec 31 00:00:00 GMT-03:00 2013
Unidade Lider: Embrapa Agroenergia
Líder de projeto: Guy de Capdeville
Contato: guy.capdeville@embrapa.br
Palavras-chave: Phaseolus vulgaris, cromossomos meióticos, FISH