O interesse na utilização de biomassa para a produção de etanol tem despertado a atenção da comunidade científica para os desafios técnicos que precisam ser vencidos. A sacarificação enzimática continua a ser um desafio para viabilizar a produção deste combustível, especialmente devido ao alto custo das enzimas para hidrólise dos polissacarídeos componentes da biomassa. Para a produção de etanol a partir dela, é necessária uma etapa de pré-tratamento efetivo, seguido da adição de elevada carga de enzimas hidrolíticas para sobrepor fatores limitantes que dificultam a hidrólise da fração celulósica. Uma das barreiras encontradas pelas enzimas hidrolíticas é o acesso limitado às moléculas de celulose que permanecem na porção interior das microfibrilas. Tem sido proposto que o afrouxamento de microfibrilas de celulose pela ação de proteínas não-hidrolíticas, como as da família das expansinas, pode facilitar o acesso à porção interior das fibras, aumentando a área superficial disponível para as enzimas hidrolíticas e tornando o processo de sacarificação mais eficiente. Além das expansinas, as monoxigenases de polissacarídeos (LPMOs) têm recebido bastante atenção devido ao seu efeito sinérgico às celulases durante o processo de sacarificação de biomassa. No entanto, apenas um pequeno número de LPMOs de origem microbiana foi caracterizado até o momento, o que dificulta sua aplicação biotecnológica. Este projeto se propõe a caracterizar novas proteínas estimuladoras da ação de enzimas celulolíticas (expansinas e monoxigenases) e validar seu uso como aditivo no processo de sacarificação de biomassa para produção de bioetanol.